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雙光子激發原理
在高光子密度情況下,熒光分子可以同時吸收2個長波長的光子,在經過一個很短的所謂激發態壽命的時間后,發射出一個波長較短的光子;其效果和使用一個波長為長波長一半的光子去激發熒光分子是相同的。
雙光子激發在生物成像中的優勢
激發波長為長波長,有更好的組織穿透性,適用于厚組織樣本觀察
更好的光學層析能力,更高的軸向分辨率
光毒性,光漂白性小,可用于長時程成像研究
高熒光收集效率,高分辨率成像
適用于活體組織細胞成像研究
FIRM-TPM實現自由行為學動物高速高分辨成像
使用能夠傳導 920 nm飛秒激光脈沖的光纖,實現飛秒激光無畸變傳導,可對神經生物學研究常用的探針GFP和GCaMP進行成像
使用新型超軟光纖束,高效收集熒光,且不影響小鼠自由活動,提高成像穩定性
使用微機電掃描振鏡進行高速掃描,實現512×512像素下,9HZ的高速雙光子成像;使用細軟的振鏡電纜給微機電提供掃描電壓,在保證良好抗干擾的條件下,盡量減輕模塊重量
使用高數值孔徑的微型物鏡,實現亞細胞水平分辨率成像
整體機械性能穩定,即使動物劇烈運動,整個系統依然可以保持穩定,不影響成像質量
體積小,重量輕和可拔插的探頭設計適用于復雜的行為學實驗,且可長時間地對自由活動的動物進行細胞結構和功能的觀察